Что такое ИГХ на лямблии

Поскольку заразиться лямблиями легко, диагноз устанавливают на основании жалоб, клинических симптомов, инструментального обследования (общий анализ крови, УЗИ печени и желчного пузыря) и результатов лабораторных анализов. По некоторым исследованиям, у 69% больных с аллергическими заболеваниями обнаруживаются лямблии.

Кому обязательно обследоваться?

Обязательному обследованию на лямблиоз подлежат следующие контингенты:

• дошкольники и младшие школьники (1-4 класс) — при формировании коллектива и после летних каникул,
• дети всех возрастов в закрытых и круглосуточных детских учреждениях — при поступлении и потом 1 раз в год,
• дети и подростки — при оформлении в образовательные и лечебные учреждения (дома ребенка, школы-интернаты, оздоровительные лагеря, санатории, детские отделения больниц),
• персонал детских садов, работники общепита и пищевой промышленности, ассенизаторы (очистка нечистот) и др. — при приеме на работу и потом 1 раз в год,
• контактные лица (общавшиеся с больным или паразитоносителем).

Обратите внимание: по современным представлениям, если у человека выявляют лямблии, лечение обязательно (!), даже если его ничего не беспокоит.

Кого обследуют по показаниям?

Амбулаторные и стационарные больные обследуются по показаниям.

1) желудочно-кишечные симптомы

• диарея (понос) невыясненной этиологии,
• упорная тошнота без других клинических симптомов,
• дисбактериоз кишечника,
• хронические заболевания ЖКТ ;

2) иммунные нарушения

• иммунодефицитные состояния,
• длительная субфебрильная лихорадка (от 37 до 38 градусов) неустановленной этиологии,
• дерматиты, нейродермиты, крапивницы, экземы,
• бронхиальная астма, обструктивные бронхиты,
• аллергии невыясненной этиологии,
• стойкая (длительная) эозинофилия крови (в норме в общем анализе крови эозинофилов 1-5%, у детей младше 2 лет 1-7%, с 2 до 6 лет — 1-6%);

3) нервно-психические симптомы

• нейроциркуляторная (вегетососудистая) дистония, особенно в сочетании с желудочно-кишечными симптомами,
• угнетенное настроение или депрессия, особенно в сочетании с желудочно-кишечными симптомами,
• отставание ребенка в физическом развитии.

Методы диагностики лямблиоза

Используются прямые и непрямые методы:

• прямые методы выявляют ляблии и их частички (антигены, ДНК),
• непрямые методы выявляют антитела (иммуноглобулины, Ig) к лямблиям, вырабатываемые иммунной системой в ответ на заражение.

Ни один из методов диагностики не выявляет зараженность с вероятностью 100% и не дает 100%-ную гарантию, что это именно лямблии.

Выявление лямблий возможно:

• в желчи (точнее, в дуоденальном содержимом, потому что концентрированная желчь убивает лямблии),
• в кале.

Самые распространенные методы:

• исследование кала (в обиходе копрологическое исследование называют «копрологией»),
• анализ крови на антитела к лямблиям.

Выявление в желчи (дуоденальном содержимом)

Метод устаревший. Можно выявлять вегетативные формы лямблий и (реже) цисты.

При фиброгастродуоденоскопии можно получить содержимое 12-перстной кишки (20-35 мл), которое также называют желчью порции «А». Полученное дуоденальное содержимое (от лат. duodenum — 12-перстная кишка) немедленно рассматривают под микроскопом, потому что подвижные вегетативные формы лямблий быстро гибнут во внешней среде (за 30-60 минут). Посуда для сбора дуоденального содержимого должна быть чистой и сухой, так как даже незначительные остатки хлорсодержащих химических веществ ускоряют гибель вегетативных форм. Более эффективно получать дуоденальное содержимое не обычным одноканальным зондом, а 3-канальным зондом в условиях вакуума.

Примечание: лямблии погибают в концентрированной желчи, поэтому в желчи порции «B» или «C» лямблии не выявляются.

Метод трудоемок и имеет низкую информативность. Сейчас используется редко.

Выявление в кале (фекалиях)

Метод является одним из основных (наряду с исследованием антител в крови). В анализе кала можно выявить цисты и (очень редко) вегетативные формы. Исследование проводится в соответствии с МУК 4.2.735-99 «Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов».

В кале ищут цисты. Найти вегетативные формы лямблий можно лишь у 5% зараженных и только в жидких фекалиях, доставив собранный материал в лабораторию не позже 15-20 минут после дефекации для немедленного исследования, т.к. вегетативные формы за 0.5-1 час погибают.

Способы исследования кала на лямблии:

• нативный мазок (от лат. nativus — естественный, природный), в нем ищут цисты и вегетативные формы,
• мазок с окраской раствором Люголя,
• методы обогащения (механического или формалин-эфирного) с последующей микроскопией. Все методы обогащения приводят к гибели вегетативных форм.

Техника сдачи кала: берут соскоб из 6-7 мест последней (!) порции фекалий (лучше жидких). Собирать материал из твердых фракций кала первой порции является неправильным и может привести к диагностической ошибке (ложноотрицательному результату).

При отрицательном первом анализе проводят не менее 3 исследований кала с интервалом в 2-3 дня. Поскольку выделение цист происходит непостоянно (возможны перерывы от 1 до 17 дней), при серьезном подозрении на лямблиоз рекомендуется исследовать кал в течение 4-5 недель с интервалом в 1 неделю.

Вегетативные формы и цисты лямблий под микроскопом.

Эффективность исследования кала может быть повышена, если:

• не применять в течение 5-7 дней препараты, которые могут нанести вред лямблиям (антибактериальные средства типа метронидазола, антациды типа смекты, противогельминтные препараты типа мебендазола, а также энтерол, интетрикс и др.).
• при запорах накануне сдачи анализа назначают слабительные (сенаде, гуталакс, солевые слабительные) и (или) желчегонные препараты,
• хотя цисты сохраняются в фекалиях до 10 дней и более, лучше исследовать кал не позже 2-3 часов после дефекации или применять консерванты (Турдыева, Сафаралиева, Барроу и др.), тщательно перемешивая кал с консервантом в соотношении 1 часть кала на 3 части консерванта.

Возможные причины диагностических ошибок:

• неправильно собран кал (рекомендуется делать соскоб из 6-7 мест последней порции фекалий);
• фекалии исследовались в «немой» период, когда цистовыделение в течение 1-2 недель отсутствует. Меры борьбы — сдавать кал повторно (для исключения цистовыделения нужно исследовать кал в течение 4-5 недель с интервалом в 1 неделю);
• погрешности лабораторного исследования (не используются все методы подготовки материала, мазок низкого качества, нет настойчивости при поиске).

Выявление антигенов лямблий в кале

Выявление антигенов лямблий в кале — это современный перспективный метод диагностики лямблиоза, однако он доступен только в крупных городах. Используется для анализа кала, но можно исследовать также биоптаты (образцы живых тканей, взятые при биопсии).

Для анализа используются моноклональные антитела к антигену GSA-65. Этот метод выявляет лямблии даже в «немые» промежутки, когда цисты не выделяются.

Антиген GSA-65 прекращает выделяться с фекалиями лишь спустя 2 недели после излечения лямблиоза.

Выявление с помощью ПЦР

С помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции) выявляют отдельные гены в ДНК лямблий. Это высокоспецифичный и чувствительный (92-98%) метод, который позволяет выявить лямблии даже в период отсутствия цистовыделения.

К сожалению, метод не распространен (даже в Москве).

Выявление антител к лямблиям

Анализ на антитела (иммуноглобулины) к лямблиям относится к непрямым (косвенным) методам, т.к. антитела образуются иммунной системой в ответ на заражение. Берется кровь из вены натощак, а исследуется сыворотка крови. Исследование проводится в соответствии с МУК 3.2.1173-02 «Серологические методы лабораторной диагностики паразитарных заболеваний» и инструкцией к диагностической тест-системе.

Какие антитела (иммуноглобулины, Ig) можно обнаружить?

• Антитела класса M («эм») появляются в крови раньше всех остальных антител и обнаруживаются в крови с 10-14 дня заболевания. IgM являются признаком свежей инвазии (инфекции). Потом количество антител класса M быстро уменьшается (тоже раньше других антител). Отсутствие IgM не исключает зараженности (возможно хроническое течение лямблиоза);
• антитела класса G («джи») образуются немного позже IgM, но сохраняются длительно (до 2-6 месяцев после полного излечения лямблиоза),
• антитела класса A определяют дополнительно для общей картины (решающего значения не имеют, их можно не определять).

Динамика антител при любой инфекции.

Запомните: определение уровня антител не годится для контроля за излеченностью, т.к. IgG сохраняются в крови длительное время, а остальные виды антител не показательны.

Уровень иммуноглобулинов зависит от состояния иммунитета, интенсивности заражения и многих других факторов. Чем выше интенсивность заражения, тем выше уровень антител в крови.

Однако при сильно сниженном иммунитете антитела к лямблиям могут НЕ обнаруживаться:

• у детей с лимфатико-гипопластическим диатезом,
• при упорном, рецидивирующем лямблиозе.

Обратите внимание, что возможны ложноположительные результаты диагностики (т.е. кажущееся наличие антител к лямблиям при отсутствии лямблий в организме). Это возможно при заражении другими простейшими паразитами (кишечная амеба, бластоцисты), антигены которых могут давать перекрестные реакции с антигенами лямблий.

Сравнение методов диагностики лямблиоза

Подавляющее большинство лабораторий предлагает только определение антител к лямблиям (IgG, IgM, IgA), самыми важными из которых являются IgG. Нужно помнить, что IgM появляются в крови спустя 2 недели после появления симптомов лямблиоза, а IgG появляются на несколько дней позже, но долго сохраняются. При резко сниженном иммунитете антител вообще может не быть. Анализ крови на антитела нельзя использовать для быстрой проверки излеченности, потому что IgG могут определяться до 2-6 месяцев после выздоровления.

Исследование кала на цисты лямблий является распространенным, но все же менее массовым методом обследования. Из-за наличия «немых» («слепых») промежутков от 1 до 17 дней, когда цистовыделение отсутствует, возможен ложноотрицательный результат анализа (лямблии в организме есть, а цист в кале временно нету). При первом отрицательном результате анализа рекомендуется сделать не менее 3 исследований кала с интервалом в 2-3 дня, а при серьезном подозрении на лямблиоз советуют проверять кал до 4-5 недель с интервалом в 1 неделю.

Анализ кала на антиген лямблий GSA-65 предпочтителен по сравнению с поиском цист в кале, однако доступен только в единичных лабораториях крупных городов. Этот анализ можно использовать для контроля излеченности лямблиоза не ранее 2 недель после окончания лечения (антиген может выделяться до 2 недель после уничтожения лямблий).

ПЦР кала на ДНК лямблий тоже является хорошим методом, однако на данный момент остается лишь теоретической возможностью.

Недопустимо ставить диагноз лямблиоза только на основании диагностики по методу Фолля. Биопсия тонкой кишки с целью диагностики лямблиоза также нецелесообразна из-за появления ПЦР и анализа на антиген GSA-65.

Любой из указанных методов не дает 100% чувствительности и специфичности. Клинические и лабораторные данные должны анализироваться комплексно.

Лямблиоз является довольно распространенным заболеванием, которое провоцируют лямблии. Из-за длительного бессимптомного периода развития болезни, большинство людей даже не подозревают о заражении паразитом.

Обычно лямблиоз диагностируют случайно во время профилактических осмотров. Для обнаружения паразитов врачи назначают анализ на лямблии разного вида.

Анализ крови (ИФА) на лямблии

Суть анализа на лямблии заключается в определении реакции антитела с антигеном. ИФА позволяет определить заражение по наличию в крови антител к лямблиям. Иммунная система при заражении вырабатывает антитела Ig с маркером M и G для борьбы с лямблиями.

Спустя 14 дней после заражения в организме появляются антитела IgM, через две недели они превращаются в IgG и остаются в организме на протяжении всей инвазии.

Данный метод диагностирования имеет множество преимуществ:

• позволяет определить стадию и форму развития болезни;
• появляется возможность выявить человека-носителя;
• проводится в короткие сроки;
• высокая точность – около 90%;
• комфортный способ отслеживания динамики инвазии;
• доступность.

Как сдавать	Расшифровка
Для анализа требуется забор венозной крови. За несколько дней до процедуры пациенту нельзя употреблять спиртные напитки, табачные изделия. Процедуру проводят утром натощак.

Прием медикаментов должен обсуждаться с лечащим врачом – это позволит поставить достоверный диагноз. За 10 часов до анализов нельзя принимать пищу, пить кофе, чай, сок. Допустимо употребление воды без газа.

Расшифровка основывается на показателях антител IgM и IgG.

• Наличие IgM указывает на острое течение инвазии;
• Наличие IgG – признак хронического лямблиоза либо недавнего выздоровления. Антитела еще некоторое время после выздоровления остаются в организме;
• При выявлении IgM и IgG – хроническая форма на стадии обострения.

Также результаты определяют по показателю ОПд:

• ОПд ниже 0,85 считается нормой – отсутствие паразита;
• ОПд больше 1 – положительный результат, хроническое, обостренное течение заражения;
• ОПд в районе 0,85-1 считается сомнительным. Для подтверждения диагноза нужен повторный анализ на лямблии, который сопровождается исследованием кала.

ПЦР на лямблии

Методика позволяет выявить паразита в верхних отделах кишечника. Анализ на лямблии основывается на изучении ДНК лямблий.

Для проведения исследований необходимо сдать кал, кровь, в редких случаях желчь. ПЦР указывает на стадию, интенсивность инвазии, определяет динамику проведенной терапии.

Как сдавать	Расшифровка
Подготовка и сбор биоматериала ничем не отличается от других анализов кала. Анализы проводятся без использования слабительных, других медикаментов, поскольку они могут повлиять на результаты. Рацион питания не имеет особого значения.

Для процедуры необходимо приобрести стерильную, чистую емкость. Фекалии собирают утром, после пробуждения, до гигиенических процедур. Собранный биоматериал помещают в емкость и плотно закрывают. В общем, должно получиться около 2 ч. ложек кала.

Важно избегать смешивания кала с мочой или другой жидкостью – это может повлиять на результаты. После сбора нужно отправить баночку с содержимым в лабораторию, в крайнем случае, ее можно хранить не более 8 часов в холодильнике.

Результаты могут быть:

• положительные – указывают на наличие паразита, требуется лечение;
• отрицательные – человек здоров, лечение не требуется;
• сомнительные – необходимо сделать повторный анализ. Если результаты будут идентичные, человек здоров.

ПЦР имеет точность около 70%, поэтому для получения достоверных результатов необходимо проходить исследование несколько раз. Обычно пациенту требуется сдавать кал на протяжении 3 дней подряд – это повышает точность практически до максимума.

Анализы проводятся повторно после курса терапии. Это необходимо для подтверждения полного излечения, исключения вероятности рецидива. Анализы кала могут сопровождаться исследованием крови.

Анализ кала на лямблии

Проведение исследований кала назначают на 5 день после проявления негативной симптоматики. Для проведения анализа у пациента должны проявляться клинические признаки инвазии, например, понос, спазмы желудка. Только после личного осмотра врач назначает прохождение диагностических процедур.

Как сдавать

Проведение анализа ничем не отличается от сбора кала для ПЦР. Подготовительные процедуры и рекомендации идентичны.

Расшифровка

Результаты также бывают положительными, сомнительными и отрицательными. При обнаружении паразита, его цист результаты считаются положительными, и требуется лечение. В остальных случаях анализ проводят повторно через неделю.

Метод ИХГ

Иммунохроматографический анализ – эффективный и максимально достоверный метод диагностирования лямблий. Подготовка к ИХГ не требует соблюдение диеты. Для проведения исследования необходимо сдать кал – манипуляция сбора ничем не отличается от других анализов.

На инвазию указывают скрытые примеси крови в фекалиях. Результаты анализа можно получить в течение 15 минут после сдачи. Несмотря на высокую эффективность ИХГ, для достоверности пациенту назначают ПЦР.

Лямблии поражают кишечник человека, вызывают множество негативных симптомов. Лечение лямблиоза является длительным и трудоемким процессом. Лучше предотвратить заражение, соблюдая профилактические меры, чем длительное время лечить его.

Существует множество методов диагностирования болезни, но поскольку инвазия на ранних стадиях не имеет негативной симптоматики, ее чаще обнаруживают во время обострения или при хронической форме.

Исследование кала в целях выявления в нем специфических молекул (антигенов), присутствующих только в клетках лямблий.

Синонимы русские

Антиген возбудителя лямблиоза.

Синонимы английские

G. lamblia antigen.

Одностадийный иммунохроматографический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Giardia lamblia (син. Giardia intestinalis, Giardia duodenalis, Lamblia intestinalis) – это паразитирующие в тонкой кишке и иногда в желчном пузыре простейшие, вызывающие развитие лямблиоза. Они могут существовать в вегетативной форме и в форме цист. После заглатывания цист из них высвобождаются трофозоиты, способные к размножению и заселению тонкого кишечника. При определенных условиях часть трофозоитов вновь образует цисты, которые выделяются с фекалиями во внешнюю среду.

Путь заражения – фекально-оральный. Оно происходит при употреблении зараженной цистами лямблий воды или пищи, а также через загрязненные цистами руки и бытовые предметы. Источник инфекции – больной лямблиозом или бессимптомный носитель. Инкубационный период составляет 3-42 дня. Лямблиоз может протекать бессимптомно с гибелью возбудителя через 1-3 месяца.

При клинически выраженном лямблиозе независимо от характера течения инфекции (острого или хронического) преобладают симптомы диареи: боли, вздутие и урчание в животе, повышенное газообразование, частый желтоватый водянистый стул с неприятным запахом. Характерна потеря аппетита, рвота и стеаторея – увеличение количества непереваренных жиров в кале из-за нарушения их всасывания. Вследствие бурного размножения лямблий в кишечнике может изменяться состав микрофлоры, что приводит к дисбактериозу. К внекишечным проявлениям лямблиоза относятся различные аллергодерматозы (неукротимый кожный зуд, крапивница, бронхиальная астма, эозинофильные легочные инфильтраты, блефариты), артрит и ринит. Сильнее всего симптомы проявляются в периоды максимальной интенсивности цистовыделения.

Чаще заболевают дети, особенно в возрасте от 1 года до 4 лет. У них инфекция протекает наиболее тяжело, может прекратиться нормальная прибавка массы тела. К группам высокого риска по развитию лямблиоза также относятся путешественники, лица с низким уровнем гигиены и социальным статусом, лица из учреждений закрытого типа (больниц, домов престарелых, тюрьм), мужчины нетрадиционной ориентации, пациенты с иммунодефицитами и мальабсорбцией, а также представители некоторых профессий (работники зоопарков, звериных питомников).

Из лабораторных методов для диагностики лямблиоза наиболее ценно обнаружение антигенов лямблий в фекалиях и биоптатах. В его основе лежит использование антител к цельным трофозоитам или моноспецифических антител к антигенам лямблий с молекулярной массой 65 кД (GSA-65). При использовании данного метода G. lamblia выявляется у 50-70 % больных после единичного анализа кала и более чем у 90 % больных после трехкратного анализа. Кроме того, в отличие от определения антител к G. lamblia в крови, этот тест позволяет выявить возбудителя в кале даже при отсутствии выраженного иммунного ответа.

Для чего используется исследование?

• Для выявления острых и хронических форм лямблиоза.
• Для выявления паразитоносителей.
• Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих со сходными симптомами, таких как бактериальная или вирусная диарея, воспалительные заболевания кишечника, заболевания, сопровождающиеся нарушением всасывания, некоторые эндокринные нарушения.
• Для контроля за эффективностью терапии лямблиоза (через 5-6 дней после ее окончания).

Когда назначается исследование?

• При диарее неустановленной этиологии.
• При хронических заболеваниях желудочно-кишечного тракта.
• При дисбактериозе кишечника.
• При гипотрофии, отставании в физическом развитии.
• При кожных заболеваниях: дерматитах, крапивнице, экземе, нейродерматитах.
• При иммунодефицитах.
• При обструктивных бронхитах и бронхиальной астме.
• При аллергии неустановленной этиологии.
• При обследовании лиц, контактировавших с больным лямблиозом или с паразитоносителем.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Результаты должны интерпретироваться в совокупности с другими клиническими данными. Выявление антигена лямблий в кале указывает на наличие лямблиоза, однако не исключает присутствия других патогенных микроорганизмов. Отсутствие антигена лямблий в кале, скорее всего, свидетельствует об отсутствии лямблиоза, однако в ряде случаев антиген может быть обнаружен при повторном исследовании кала. Поэтому если результат отрицательный, но есть симптомы инфекции, то необходимо повторное исследование.

Причины положительного результата

• Острый или хронический лямблиоз.
• Носительство G. lamblia.

Причины отрицательного результата

• Отсутствие инфицирования лямблиями.
• Малое количество возбудителя в кале.

Наибольшее количество возбудителя в организме наблюдается в течение первой недели с момента появления симптомов лямблиоза, поэтому наиболее целесообразно исследовать образцы кала в этот период.

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, педиатр, терапевт, врач общей практики, инфекционист.